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血清乳酸脱氢酶

基本信息

  • 专科分类： 心血管
  • 检查分类： 生化检查
  • 适用性别： 男女均适用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手术参考价： 10元
  • 科　室： 心血管

血清乳酸脱氢酶检查简介

乳酸脱氢酶(LDH或LD)是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一，可催化丙酮酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应，也可催化相关的α-酮酸。LDH广泛存在于人体组织中，以心、肾、骨骼肌含量最高，肝、脾、胰和肺组织次之。LDH测定方法主要有比色法和连续监测法。

血清乳酸脱氢酶检查过程

取材：血液

原理：

（1）比色法：LDH以NAD＋作氢的受体，催化乳酸脱氢，生成丙酮酸，后者与2，4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液呈红色，根据颜色深浅求出酶活性。

（2）连续监测法：LDH可催化L-乳酸生成丙酮酸，同时NAD＋还原成NADH，在340nm处吸光度的增高速率与酶活力成正比。

试剂：

（1）比色法：

①底物缓冲液（含0.3mol/L乳酸锂，pH8.8）：取乳酸锂2.88g，二乙醇胺2.1g，加蒸馏水约80ml溶解，以1mol/LHCl调pH8.8，加水至100ml。

②11.3mmol/L辅酶Ⅰ（NAD）溶液：称氧化型辅酶Ⅰ15mg，溶于20ml蒸馏水中，冰箱保存可用2周。

③1mmol/L2，4-二硝基苯肼（DNPH）溶液：称取DNPH200mg，加10mol/LHCl100ml，溶后加水至1000ml，置棕色瓶内室温保存。

④0.4mol/LNaOH溶液。

⑤1mmol/L丙酮酸标准液：称取丙酮酸钠（AR级）11.0mg，以底物缓冲液溶解并稀释至100ml，临用前配制。

（2）连续监测法：

①55mmol/L乳酸锂Tris缓冲液：称取乳酸锂5.28g，Tris6.68g，溶于800ml蒸馏水中，在37℃水浴箱中用1mol/LHCl调pH至8.9（约需46ml），加水至1000ml，冰箱保存。

②12mmol/LNAD溶液：称取NAD79.6mg，溶于10ml蒸馏水中，冰箱保存可用2周。

③基质应用液（含NAD6mmol/L）：根据当天用量将上述NAD溶液和乳酸钾Tris缓冲液等量混合即可。商品试剂盒按其说明溶解，恢复至室温25℃使用。

操作方法：

（1）比色法：按表1操作。

混匀，室温放置5min后，在440nm波长，比色杯光径1.0cm，蒸馏水调零点，读取各管吸光度，以AU-AC之差值查标准曲线，求出LDH活力单位。

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